科技成果汇编：生物医药大健康领域（三）

项目1：10-20μm级单细胞高通量人工显微注射方法

项目2：提升细胞外基质弹性纤维交联的纳米传输抗衰老产品研发及产业化

项目3：一种小立碗藓原生质体高效制备技术

项目4：基于多重ddPCR的微生态分析方法

项目5：“绞股降脂饮”保健产品

项目一：10-20μm级单细胞高通量人工显微注射方法

1项目简介

本研究团队掌握了10-20μm级单细胞显微注射技术，可以对特定细胞（以游动单细胞微藻为例）进行抓取、转移和开展单细胞注射等任务，每天具有100-500个细胞高通量人工显微注射处理能力。此外，显微注射法递送外源物质的效率要比电转化等常见方法高，且细胞毒性和转化成功率等指标方面都优于常见转化方法。可实现大体积注射（pL级）和小体积注射（fL级）。在应用方面，单细胞微藻往往具细胞壁和鞭毛，相较于动物细胞无细胞壁、弱运动或无运动特性更难以使用显微技术开展相关研究，且缺乏相关自动化注射设备。本研究团队将Crispr/Cas9基因编辑和单细胞显微注射技术相结合，成功实现了单胞藻纤细裸藻（Euglena gracilis）细胞目的基因的编辑。目前，该方法在微藻领域的应用尚属首次报道，这对微藻单细胞研究思路、研究手段等具有更新和指引作用。

该方法在生殖细胞核融合研究、胚胎干细胞研究、药物开发和微藻单细胞遗传转化等领域具有很好应用前景，特别是微藻细胞研究领域，单细胞显微注射技术的应用几乎是一片空白。

项目二：提升细胞外基质弹性纤维交联的纳米传输抗衰老产品研发及产业化

1项目简介

弹性纤维和胶原蛋白是细胞外基质中的两个主要生物高聚物成分，其单体必须在交联酶LOXL1的作用下形成空间有序结构才有功能。由于LOXL1随年龄增长逐渐下降，会造成一系列弹性纤维异常所致的衰老相关疾病，包括皮肤松弛、心血管异常、肺气肿、女性盆腔脱垂，男性阴茎脱垂以及视网膜黄斑病变等。本项目通过高通量筛选取得了提升细胞外基质弹性纤维活力的专利技术，并结合纳米传输技术，提高了抗衰活性成分的生物利用度，使产品更易吸收，深入真皮层发挥功效。本产品明显减少皱纹、细纹；有效提升体内LOXL1表达量；增加真皮层中胶原蛋白和弹性纤维交联，增加皮肤弹性恢复年轻态；保护皮肤免受UV损伤，改善UV引起的肌肤干燥、粗糙、细纹；抑制酪氨酸酶活性，减少黑色素的产生，同时促进新陈代谢，加速黑色素的消失；首创精准抗衰科技，开发高端抗衰新一代产品。

项目三：一种小立碗藓原生质体高效制备技术

1项目简介

小立碗藓（Physcomitrium patens, Pp）由于具有同源重组率高、再生能力强、可以液体悬浮培养，用于半连续式光合自养生物反应器大规模培养等优势，被用来生产疫苗、人血清白蛋白等药物，具有非常高的基础研究及应用价值。

无论是基础研究还是生产应用，大多都是从制备小立碗藓原生质体开始。目前，制备小立碗藓原生质体需要用到崩溃酶，例如，公开号为 CN106******A的现有专利公开了一种小立碗藓原生质体的制备方法，将小立碗藓孢子经植物组织快繁培养得到原丝体，粉碎后在BCD培养基中培养，崩溃酶酶解，即得原生质体。该方法促进了小立碗藓原生质体的制备及再生，提高了原生质体的数量、质量和转基因效率。且崩溃酶是一种从真菌-担子菌中提纯出来的复合酶，内含昆布多糖酶、木聚糖酶和纤维素酶，消极细胞壁的能力强，非常适合于制备小立碗藓的原生质体。但是，由于崩溃酶的原材料短缺，导致崩溃酶短缺、价格上涨，从而影响到了国内外研究者从事小立碗藓的研究。因此，本技术提供另外一种成本低，是崩溃酶价格的1/3、效率高、无需用到崩溃酶既能制备得到高质量小立碗藓原生质体的方法。为生产疫苗、人血清白蛋白等药物提供更有经济效益的技术途径。

项目四：基于多重ddPCR的微生态分析方法

1项目简介

阴道微生态是女性重要微生态区之一，在女性生殖道的健康和疾病中起着重要作用。通过分析阴道微生物的组成及相对丰度，对阴道微生物群落状态类型（CST）进行分型，可帮助监测和分析女性阴道的健康状况。

现有的微生态分析方法包括培养法和高通量测序技术，但均存在检测时间长、成本高、数据繁冗且灵敏度不足等问题。针对上述问题，本项目提出了一种多重液滴数字PCR(ddPCR)方法，对人体微生物进行快速鉴定和准确定量分析。在对高丰度的卷曲乳杆菌(L. crispatus)和低丰度的惰性乳杆菌(L. iners)的双重检测中，多重ddPCR方法可以定量0.001%的L. iners，比16S rRNA测序方法提升100倍。多重ddPCR方法可以在4小时内进行样品的批量定量检测，手动操作时间少于1小时。利用多重ddPCR方法对50例临床阴道拭子标本进行阴道微生物群落状态类型(CST)分类结果与16S rRNA测序结果完全一致。以上结果表明多重ddPCR方法在临床微生物分析中具有巨大潜力。

相较于传统的微生态分析方法，本方法检测成本低、时间短，5小时内可获得分型结果；结果分析简单；检测性能更优，可鉴定到“种”水平，灵敏度低至0.001%，可以更好地满足微生物分析的要求；方法扩展性好，可推广至肠道微生态、口腔微生态分析等。

项目五：“绞股降脂饮”保健产品

1项目简介

    本品采用“独特萃取”和“活性成分集群→分类富集→再配伍”等复杂生产工艺，从降血脂类保健茶品“绞股蓝”中复配出降脂精华。复配出的产品中成分之间在降脂作用上产生相互协同的，目前已通过体外脂代谢模型、体内高血脂模式动物以及一定数量的试品人群得以验证，具有很好的降血脂、减肥等作用。本产品相关技术已申请国家发明专利保护。同时，本品采用多单元微粒给药系统，根据各种有效成分的理化特性分别制成配方颗粒。本品服用方便，温水冲服即可快速溶解，溶液澄清透明，有淡淡普洱茶香，汤色红亮通透，品尝沉香纯正，滋味甘润。本产品是“三高”和“肥胖”人群的绝佳保健饮品。儿童、孕妇、乳母不适宜饮用。

联系电话：15060521739

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